体外诊断试剂方法学比对试验

方法学比对是评价体外诊断试剂准确度的重要手段，通常以已上市且性能公认的方法作为参照，通过同一批样本的平行测定来判断两者结果是否一致。比对研究不仅用于注册申报，也常用于方法变更、平台迁移与多中心一致性评价。判断比对结论是否可靠，关键在于比对方法的选择、样本浓度分布、数据统计方式与偏差评价是否规范。本文据此展开要点说明。

一、比对方法的选择原则

参照方法应具有明确的溯源性与良好的性能记录，优先选择参考方法或已获批准的同类方法。参照方法的测量范围应覆盖产品的预期范围，且其精密度与准确度不应成为限制结果判读的瓶颈。申请人还应说明参照方法的校准溯源链，以及两家方法在检测原理上的差异是否会影响可比性分析。

• 优先选择参考方法或公认性能良好的已上市方法。
• 参照方法的测量区间应覆盖产品的宣称范围。
• 参照方法应具备可追溯的校准体系与稳定的质量记录。
• 如原理差异较大，需说明其对结果解释的影响。

二、样本量与浓度分布

比对试验的样本量应满足统计推断要求，一般情况下建议不少于四十例，样本浓度需覆盖医学决定水平附近及测量区间的低、中、高段。对定量产品，落在医学决定水平或临界值附近的样本应占有一定比例，以便敏感地发现偏差。定性产品的样本应包含足够数量的阳性与阴性例，并覆盖弱阳性等易错区间。

1. 按浓度分层设计样本，避免集中于区间中间。
2. 在临界值或医学决定水平附近加密布点。
3. 样本应为临床真实样本，必要时补充参考物质或稀释样本。
4. 记录样本采集、保存与处理条件，保证检测条件一致。

三、离群值处理与回归分析

数据处理阶段应先绘制散点图观察整体趋势，识别可能的离群点。对离群值不宜直接删除，需核实原因并说明处理依据。当数据呈线性关系时可采用回归分析，给出回归方程与相关系数；当数据分布较宽或存在偏态时，可考虑差值分析或对数转换后再评价。无论采用何种方法，都应避免仅以相关系数作为一致性的唯一证据。

• 绘制散点图与偏差图，直观呈现一致性与偏差趋势。
• 计算回归方程、斜率与截距，评价比例与固定偏差。
• 必要时开展相关性分析，但不得替代偏差评价。
• 对离群点逐例核查，说明保留或剔除的理由。

四、偏差估计与一致性判读

一致性评价的核心是估计两方法在各浓度水平下的偏差及其可接受性。可采用差值均值与置信区间、Bland-Altman分析或符合率计算等方式，并重点考察医学决定水平处的偏差是否在临床可接受范围内。定性产品常用阳性符合率、阴性符合率与总符合率，并计算Kappa值评价一致性强度。

1. 按浓度区间分别估计平均偏差与允许偏差范围。
2. 重点评价医学决定水平附近的偏差是否可接受。
3. 定性结果计算符合率及一致性检验统计量。
4. 结合临床需求判断偏差是否影响诊疗决策。

五、资料撰写与常见问题

比对资料应清晰说明设计、执行与统计全过程，并附原始数据与统计报告。常见问题包括样本量不足、浓度分布不合理、参照方法选择不当、只报告相关系数以及结论与数据不符。企业在撰写时应保持术语统一，把比对结论与产品的准确度宣称对应起来，避免出现无数据支撑的性能表述。

• 样本量偏少，统计结论的稳定性不足。
• 浓度分布失衡，未能覆盖临界值附近区间。
• 只报相关不报偏差，掩盖系统性差异。
• 结论夸大，超出数据所能支持的范围。

方法学比对是把新产品放入既有检测体系进行验证的过程，其结论应能回答结果是否可与现行方法互换使用。企业宜根据产品定位提前规划比对方案，合理分配样本与检测资源，并在结果不理想时分析原因、必要时调整产品后再评价。将比对研究纳入产品验证的常规环节，有助于提升注册资料的完整性与临床使用的可信度。

官方来源：国家药监局·医疗器械行业标准公告